<正>(2026年4月20日修订)尊敬的广大作者:《中国兽医科学》为学术性期刊,设有预防兽医学、基础兽医学、临床兽医学、研究进展评述共4个栏目。主要刊登具有较高学术水平的兽医科学研究论著和相关学术论文。1约定1.1中国农业科学院兰州兽医研究所主办的《中国兽医科学》为《中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有限公司、北京世纪超星信息技术发展有限责任公司、北京万方数据股份有限公司入选期刊。本刊主办单位中国农业科学院兰州兽医研究所与中国农业科学技术出版社签订了“《中国兽医科学》期刊内容资源采购合同”;根据此合同,中国农业科学技术出版社享有所采购资源的信息网络传播权、复制权、发行权、改编权、汇编权和翻译权。
IL-31通过与其受体结合，在多种皮肤炎症过程中发挥关键生物学作用。本研究通过构建犬IL-31蛋白原核表达载体，利用大肠杆菌表达系统成功表达后纯化出高纯度的重组犬IL-31蛋白。以该重组蛋白免疫BALB/c小鼠，通过3次免疫、细胞融合与有限稀释法筛选，成功获得1株可稳定分泌抗犬IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F2，其抗体亚型为Ig G1/λ，纯化后的抗体效价可达1∶13 107 200。为进一步验证抗体的特异性，构建真核表达质粒并在HEK-293T细胞中表达犬IL-31。Western-blot结果表明，1F2单克隆抗体能够特异性识别真核系统中表达的犬IL-31蛋白，表明有良好的反应特异性。本研究成功制备的抗犬IL-31单克隆抗体1F2，为后续开发针对犬IL-31的治疗性抗体及相关检测方法的建立奠定了基础。
为了研究猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）流行毒株的生物学特性，制备相应的针对性疫苗，本研究采集临床腹泻仔猪小肠病料，将RT-PCR阳性病料接种猪睾丸细胞（ST）细胞进行病毒分离。对其中1株强致细胞病变分离株进行了血清学检测和形态学观察鉴定、病毒S基因遗传进化分析，并评估该分离株对仔猪的致病性。利用该毒株制备免疫原，于母猪产前约45 d进行免疫，测定所产哺乳仔猪的中和抗体水平，并对5日龄仔猪进行攻毒，测定母乳抗体的免疫保护效果。试验结果确定，分离出了1株可在体外培养的PDCoV毒株，将其命名为PDCoV-DQ。致病性试验结果表明，该分离株能够导致5日龄仔猪出现水样腹泻、精神沉郁等症状；感染后第24小时，可在仔猪粪便中检测到病毒，攻毒发病率和排毒率均为100%。免疫母猪哺乳仔猪的中和抗体水平检测表明，仔猪在哺乳期第28天体内存在较高水平的母源抗体。免疫攻毒试验结果表明，免疫攻毒后的发病保护率为100%，排毒率降为20%，被动免疫具有良好的保护效果。本研究提示，通过免疫妊娠母猪可以有效预防仔猪感染PDCoV。
旨在阐明ALKBH5基因通过m6A去甲基化酶功能在口蹄疫病毒（FMDV）复制中的作用与机制。通过CRISPR/Cas9技术成功构建了ALKBH5基因敲除的BHK-21细胞系，并经Western-blot验证敲除效率。CCK-8试验证实敲除后细胞活性无显著变化。分别用FMDV感染野生型与敲除型细胞后，检测发现ALKBH5敲除可显著提升病毒2C蛋白表达、病毒RNA转录水平及病毒滴度，表明其敲除促进FMDV复制。进一步的酶活性回补试验显示，回补野生型ALKBH5后可抑制病毒复制，而其酶活性关键位点突变体（R131A）则丧失该抑制能力，证明ALKBH5对FMDV复制的抑制作用依赖其去甲基化酶活性。本研究揭示ALKBH5作为宿主限制因子，通过m6A去甲基化负调控FMDV复制，为深入解析病毒感染机制及开发抗病毒新药物提供了理论依据。
为评估Src家族酪氨酸激酶（SFKs）抑制剂PP2对新城疫病毒（NDV）感染的影响，以鸡巨噬细胞HD11为模型，通过测定细胞活性确定PP2在HD11中的工作浓度。随后通过间接免疫荧光、Western-blot、荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)及血凝试验评估PP2处理对NDV不同感染阶段的影响。结果显示，PP2显著抑制了NDV在HD11细胞内的蛋白表达及子代病毒释放。进一步研究发现，PP2不影响NDV的吸附和进入过程，但能抑制其进入细胞后的RNA合成阶段。此外，PP2在不同细胞中均表现出对NDV的抑制作用，且与PP2作用靶点相同的SFKs抑制剂PP1和RK24466具有类似的体外抗NDV效果。综上所述，PP2能够有效抑制NDV复制，为基于宿主靶点的新型抗NDV策略提供了参考。
羊肠道病毒（CEV）是导致羊腹泻疾病的重要病原之一，为了解CEV毒株的流行特点，于2023年采集了江苏省三地市78份山羊粪便样品并进行了RT-PCR检测。结果显示，江苏省不同地区均存在CEV感染，检测出阳性样本30份，各地区阳性率为14.29%～81.81%，总阳性率为38.46%。从山羊样品中分离到CEV毒株1株，将其命名为XY2302株，通过RT-PCR、IFA、电镜观察、高通量测序等方法分析该病毒特征。结果显示，该毒株接种MDBK细胞后可观察到明显的细胞病变，IFA鉴定可见特异荧光，电镜观察到直径20～30 nm的无囊膜病毒颗粒，具有典型的肠道病毒形态学特征。同源性分析显示，分离毒株的全基因组、5′-UTR、VP1和2AB与参考毒株的同源性分别为73.4%～79.2%、80.2%～93.4%、66.9%～100.0%和26.6%～64.1%。遗传进化分析显示分离株与EV-G5代表毒株位于同一分支，亲缘性较高，其中VP1序列与EV-G5毒株的同源性最高，为100%。2AB序列与其他参考序列差异较大，在进化树中形成独立分支。研究表明，CEV在江苏地区山羊中仍然具有较高的阳性率，毒株基因组序列存在一定变异，丰富了国内CEV病原学与遗传进化数据，为该病毒流行病学、遗传演化分析提供了基础资料。
为制备非洲猪瘟病毒（ASFV）K205R蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性，利用细胞融合技术制备抗体，通过免疫印迹、间接免疫荧光、免疫共沉淀试验验证抗体特异性，用间接ELISA测定抗体效价，并进行亚型鉴定，最后通过中和试验鉴定其病毒中和活性。结果显示，真核表达的K205R蛋白大小在23 k Da左右，与预测大小一致；筛选获得5株针对K205R蛋白的单克隆抗体细胞株，免疫印迹显示5株单克隆抗体对ASFV感染细胞样品中的K205R蛋白有较强的特异性反应，不与口蹄疫病毒感染样品发生交叉反应；间接免疫荧光试验进一步证实，5株单克隆抗体对细胞中转染或ASFV感染产生的K205R蛋白具有特异性识别能力；间接ELISA测定5株单抗的效价最高可达1∶819 200；亚型鉴定结果显示5株单抗的重链均为Ig G1，轻链均为Kappa；中和试验结果显示单抗A11-E11具有一定的病毒中和活性；免疫共沉淀试验进一步验证A11-E11株抗体能特异性结合ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞中的K205R蛋白。综上所述，成功制备了针对ASFV K205R蛋白的单克隆抗体，该抗体对K205R蛋白具有较好的特异性，为进一步研究K205R蛋白的生物学功能奠定了基础，同时为非洲猪瘟诊断技术的建立提供了材料。
2024年初，青海省某辖区内牦牛发生高热、呼吸困难、流鼻涕等症状，采集1例因严重呼吸道症状而濒死的牦牛肺样品，进行细菌的分离鉴定、形态学观察、16S rRNA测序及分析、荚膜血清型和脂多糖基因型鉴定、毒力因子检测、耐药试验以及对小鼠致病性试验等。结果显示：从牦牛肺中分离出2株荚膜A型、脂多糖L3型多杀性巴氏杆菌菌株；在含100 m L/L新生牛血清的TSA固体培养基上长出灰白色、半透明的圆形菌落；分离菌16SrRNA测序结果与NCBI上公布的多杀性巴氏杆菌的同源性分别为99.58%和99.79%，分别命名为ML-Pm-1和ML-Pm-2。多杀性巴氏杆菌中23种毒力基因检测后发现，ML-Pm-1分离株包含19种毒力基因，ML-Pm-2包含20种毒力基因。2株分离菌对大部分抗生素均敏感，ML-Pm-1对林可霉素类和氨基糖苷类的新霉素中度敏感，ML-Pm-2对大环内酯类的麦迪霉素、青霉素类的苯唑西林中度敏感，对林可霉素类耐药。2.3×10~0CFU/只感染剂量的ML-Pm-1菌液可导致小鼠在3 d内全部死亡；1.2×10~7CFU/只感染剂量的ML-Pm-2菌液可导致小鼠在10 d内全部死亡，且感染小鼠肺、肝、脾出血等病变严重，可见2株牦牛源多杀性巴氏杆菌对小鼠的致病性都较强。本研究成功分离到2株牦牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌，为牦牛巴氏杆菌病的流行病学调查和防控提供了参考。
本研究旨在获得猪源核糖体RNA加工蛋白1B(RRP1B)多克隆抗体并研究其与核糖体及核仁共定位情况。通过RT-PCR技术，扩增IPEC-J2中完整的RRP1B基因，构建pcDNA3.1(+)-RRP1B-His真核表达质粒，经测序鉴定后转染HEK-293T和IPEC-J2，采用间接免疫荧光试验（IFA）和Western-blot方法检测RRP1B表达情况。利用镍柱亲和层析法纯化带有His标签的重组RRP1B，以His-RRP1B作为免疫原，皮下注射BALB/c小鼠，制备多克隆抗体。通过Western-blot和IFA试验测定抗体效价，评价免疫原性。同时利用制备的多克隆抗体进行RRP1B与核糖体及核仁共定位试验。结果表明，重组质粒pcDNA3.1(+)-RRP1B-His能够在HEK-293T和IPEC-J2内表达。制备的重组RRP1B免疫小鼠可产生较高水平抗体，抗体效价可达1∶2 000以上；免疫荧光共定位试验发现RRP1B定位于核仁中，与核糖体没有明显共定位现象。本研究为后续研究RRP1B的生物学功能奠定了基础。
分析2024年我国北方地区分离的25株布鲁菌临床分离株的耐药特征，为布鲁菌病的综合防控和临床治疗提供科学依据。选取2024年1―12月从北京、河北、内蒙古等9个省（自治区、直辖市）动物病料中分离的25株布鲁菌以及市面上现存的8种商品化疫苗，采用纸片扩散法（K-B法）结合全基因组测序（WGS）技术，检测其对12种抗菌药物的敏感性并分析耐药基因分布特征。药敏试验结果显示：利福平耐药率最高（36.0%,9/25），其余依次为红霉素（20.0%,5/25）、氨苄西林（8.0%,2/25）、链霉素和氯霉素（均为4.0%,1/25）。所有菌株对头孢噻肟、阿莫西林、庆大霉素、四环素类（四环素、多西环素）及喹诺酮类（氧氟沙星、左氧氟沙星）均敏感。WGS分析揭示了耐药菌株的抗生素耐药基因分布特征。值得注意的是，以K-B法的单一结果为参考，8种商品化疫苗株参考菌株对链霉素、四环素、红霉素和利福平均显示不同程度的耐药性，其中BA0711为多重耐药菌株（同时对链霉素、四环素和利福平耐药）。结果表明，我国北方地区动物源布鲁菌耐药形势严峻，特别是疫苗株中可能存在的耐药性问题对加剧临床治疗难度有一定的影响。建议加强耐药监测和规范抗菌药物使用，并开展基于药敏试验的精准治疗以控制耐药菌株传播。